телефон:   E-mail:

(812) 611-30-09

 

info@analitlab.ru

E-mail: info@analitlab.ru

телефон: (812) 611-30-09

Rambler's Top100  

Набор реагентов для окраски урогенитальных трихомонад по Граму (с нейтральным красным).

НАЗНАЧЕНИЕ

Набор реагентов для окраски по Граму с нейтральным красным предназначен для окраски урогенитальных трихомонад.

ПРИНЦИП РЕАКЦИИ

Для окраски по Граму чаще используют красители трифенилметановой группы: генциановый, метиловый фиолетовый или кристалвиолет. Грамположительные Грам (+) микроорганизмы дают прочное соединение с указанными красителями и йодом. При этом они не обесцвечиваются при воздействии на них спиртом, вследствие чего при дополнительной окраске фуксином Грам (+) микроорганизмы не изменяют первоначально принятый фиолетовый цвет.

Грамотрицательные Грам (-) микроорганизмы образуют с основными красителями и йодом легко разрушающееся под действием спирта соединение. В результате микробы обесцвечиваются, и затем окрашиваются фуксином, приобретая красный цвет.

РЕАГЕНТЫ

Набор обеспечивает 200 исследований (при расходе 0,5 мл реагента на одно исследование).

1. Карболовый раствор генцианвиолета 1 фл (100 мл)

2. Раствор Люголя 1 фл (100 мл)

3. Нейтральный красный 1 фл (100 мл)

ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ


Предметное стекло перед исследованием должно быть тщательно вымыто и обезжирено смесью для обезжиривания предметных стекол.

Для фиксации мазков применяют метиловый спирт, ацетон, смесь Никифорова , жидкость Карнуа. Предметное стекло с высушенным мазком погружают в склянку с фиксирующим веществом на 10-15 минут и затем высушивают на воздухе .

Либо полученные мазки тщательно высушивают и затем фиксируют сухим жаром. Фиксация достигается посредством несильного нагревания (примерно до 70°С) предметного стекла, которое для этого трижды проводят над пламенем спиртовки мазком вверх.

МЕТОДИКА ОКРАСКИ

1. Помещают на мазок полоску фильтровальной бумаги и наносят на фиксированный мазок несколько капель карболового раствора генцианвиолета (реагент 1) и выдерживают 2-3 минуты. Сливают краску, удаляют фильтровальную бумагу и споласкивают в проточной воде (до 30 сек).

2. Мазок заливают на 1-2 мин раствором Люголя (реагент 2) до почернения препарата.

3. Раствор сливают, мазок промывают водой (водопроводной или дистилированной).

4. Дифференцируют 96° спиртом, наливая и сливая его, пока отходит синяя краска и не обесцветится мазок (приблизительно 20-60 секунд). Во время дифференцировки препарат все время покачивают. Если вместо спирта использовать ацетон, то промывание продолжается 30 сек. Можно дифференцировать смесью спирта и ацетона (1:1) 30 с.

5. Тщательно промывают стекло в проточной или дистиллированной воде 1-2 мин

6. Для выявления урогенитальных трихомонад препараты дополнительно окрашивают раствором нейтрального красного (реагент 3) (несколько капель) в течение 2-3 минут.

7. Промывают в проточной воде и высушивают фильтровальной бумагой.

Окрашенные мазки исследуют в масле, с иммерсионным объективом; при желании заключают в бальзам, в таком случае на окрашенный и хорошо высушенный мазок кладут каплю бальзама и покрывают покровным стеклом.

РЕЗУЛЬТАТ ОКРАСКИ

Ядра трихомонад - синии, сине-фиолетовые, цитоплазма трихомонад - желтая, оранжевая. Грамположительные бактерии имеют сине-фиолетовый цвет (темно-синий), а грамотрицательные - розово-красный, красный или коричневый.
 

Создать сайт в Мегагрупп.ру